PDMS-玻璃微流控芯片上附着态HepG2细胞低温保存条件研究

摘要

微流控芯片上细胞样本的低温保存能够显著缩短芯片上细胞实验周期、降低实验成本,有助于芯片上细胞实验的广泛应用.本文对PDMS-玻璃微流控芯片上附着态HepG2细胞的低温保存条件进行了研究,包括降温速率、低温保护剂、低温存储时间及存储温度,确定了芯片上附着态HepG2细胞的低温保存方案.结果 表明:采用不同的冷却环境、冷却介质,芯片微通道内能够实现0.36～35.12℃/min的降温速率;芯片上附着态HepG2细胞低温保存存在最优降温速率0.5～1.5℃/min;-20℃或液氮表面上方40 cm处冷却环境与-80℃冷却环境组合冻存能够显著提高芯片上冻存7 d的HepG2细胞存活率;体积浓度为20％的DMSO与0.1 mol/L海藻糖联合能够显著提高芯片上冻存HepG2细胞活性.经过上述冻存条件优化后,芯片上附着态HepG2细胞冻存7 d活性超过90％.