BMSCs移植联合应用G-CSF对放射性脊髓损伤凋亡因子表达的影响

摘要

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植联合应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对放射性脊髓损伤中凋亡因子Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响.方法 采用全骨髓贴壁法进行体外分离、培养骨髓间充质干细胞.根据实验要求将45只大鼠随机分为3组,A组为正常对照组,B组为放疗后脊髓损伤组,C组为放疗后脊髓损伤移植组,每组各15只.采用5 MeV电子线照射胸部中段脊髓,照射剂量为5 Gy/次,总剂量为40 Gy.C组在接受照射24 h后采用第三代BMSCs(106个/ml)1 ml联合G-CSF尾部静脉注射治疗每周1次.放疗结束20周后,取各组大鼠脊髓组织行HE染色,在光镜和透射电镜观察脊髓组织的形态学变化,免疫组化检测Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平,应用流式检测其凋亡水平.结果 HE染色照射组神经元消失,髓鞘脱落,细胞核固缩,部分核消失.治疗组有小部分神经元,核结构不清楚,髓鞘脱落不明显.电镜结果在微形态上比较,治疗组比照射组有明显改善和好转.免疫组化结果表明照射组表达的Bax和Caspase-3阳性细胞增加,治疗组表达的Bcl-2阳性细胞增加(P＜0.05).流式凋亡检测表明治疗组的细胞凋亡率显著低于照射组(P＜0.05).结论 放射性脊髓损伤的大鼠采用BMSCS移植联合应用G-CSF治疗,可以抑制Caspase-3、Bax的表达,上调Bcl-2表达,具有抗细胞凋亡作用.