磷脂酶CB1对胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的探讨磷脂酶CB1(PLCB1)对胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的影响。方法选取50例新鲜神经胶质瘤组织(胶质瘤组)及其癌旁非肿瘤组织(癌旁组),每份组织样本分为两份,一份采用免疫组化法分析检测组织中PLCB1的表达,一份采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western-blot实验检测组织中PLCB1的表达。体外培养胶质瘤U87细胞,将PLCB1 siRNA(PLCB1 siRNA组)和Con siRNA(Con siRNA组)分别转染至神经胶质瘤U87细胞后,采用CCK-8分析检测PLCB1对两组细胞增殖的影响;采用Transwell实验和划痕实验检测PLCB1对两组细胞侵袭和迁移的影响;采用Western-blot实验检测PLCB1 siRNA组和Con siRNA组中细胞外调节蛋白激酶(ERK)以及磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)的表达水平。结果qPCR检测结果显示,胶质瘤组中PLCB1 mRNA的表达水平明显高于癌旁组(t=131.29,P<0.01);免疫组化和Western-blot检测结果显示,胶质瘤组中PLCB1蛋白表达量明显高于癌旁组(t=100.53、50.25,P<0.01)。CCK-8分析结果显示,与Con siRNA组相比,PLCB1 siRNA组中神经胶质瘤U87细胞的增殖能力明显抑制(F=61.16,P<0.05)。Transwell和划痕实验结果显示,与Con siRNA组相比,PLCB1 siRNA组细胞侵袭和迁移能力明显受到抑制(F=29.96、55.71,P<0.05)。Western-blot实验结果显示,PLCB1 siRNA可以抑制p-ERK1/2的表达(F=17.98、24.67,P<0.01)。结论胶质瘤组织中PLCB1蛋白高表达,PLCB1通过激活ERK通路促进胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移。