人体脂肪基质细胞分离培养及其成骨潜能

摘要

目的:分离人体脂肪基质细胞并诱导培养其成骨表型.方法:将脂肪抽吸术获取的人体脂肪进行机械分割,通过Ⅰ型胶原酶消化后得到脂肪基质细胞,在BGJb培养基中原代培养10 d,消化传代后用含体积分数10%FBS及10-8mol/L地塞米松,50 mg/L左旋抗坏血酸,10 nmol/L维生素D3,10 mmol/Lβ-磷酸甘油钠的DMEM/F12培养基中诱导培养14 d,观察细胞形态,绘制细胞生长曲线并对其成骨表型进行鉴定.结果:脂肪基质细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,其中的成体干细胞经诱导培养后体积明显增大,胞核大面圆,胞浆丰富,群体倍增时间为66 h.Gomori萘酚磷酸酯法染色显示其胞浆内富含碱性磷酸酶颗粒,yon Kossa染色表明聚集的细胞团能形成矿化结节.结论:脂肪基质细胞中的成体干细胞经过矿化诱导培养后可向成骨细胞分化,并具有明显的成骨表型.