长链非编码lncRNA DBH-AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响及作用机制

摘要

目的 探讨长链非编码lncRNA DBH-AS1(DBH-AS1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响及机制.方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中DBH-AS1、MicroRNA-138(miR-138)和Hypoxia-inducible factor-1α(HIF-1α)的mRNA表达水平.采用双荧光素酶报告分析三者的结合情况.采用流式细胞技术、qRT-PCR和免疫印迹法(Western blot)检测敲低或过表达DBH-AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响,并分析miR-138和HIF-1α的表达变化.结果 DBH-AS1和HIF-1α瘢痕疙瘩组织和细胞中显著上调,而miR-138明显下调(P<0.05).双荧光素酶结果显示DBH-AS1能够靶向结合miR-138,miR-138能够靶向结合HIF-1α.低表达DBH-AS1或过表达miR-138明显促进瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡.敲低miR-138能逆转沉默DBH-AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响,敲低HIF-1α显著抑制沉默miR-138对细胞凋亡的作用(P<0.05).结论 低表达DBH-AS1能够通过调控miR-138/HIF-1α通路促进瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡,提示DBH-AS1可能成为瘢痕疙瘩治疗的一个潜在靶点.