猪真皮基质上培养人表皮细胞重组皮肤的实验研究

摘要

目的:在猪真皮基质培养人表皮细胞重组复合皮.方法:取成人健康的包皮(包皮切除术自愿的提供者)1 cm2全层皮片中用Th-Tr法分离表皮细胞并进行计数,以无血清完全培养基培养法作为原代细胞培养,空白对照组不放任何培养支持物.脱细胞猪真皮基质作为支架的气液界面培养法培养表皮细胞为实验组.形态学、常规组织学、HE染色观察,免疫组织染色(SABC法)检测复合皮肤中Pancy-tokeratin和层粘连蛋白(laminin).结果:HE染色显示有2层上皮细胞形成和无基底膜形成,稍有角质化,免疫组化染色显示Pancy-tokeratin(+++),提示在猪真皮基质上生长的为人表皮细胞;Laminin(±),提示培养的人表皮细胞产生的新的基底膜不明显.结论:在猪真皮基质上能进行人表皮细胞的培养,这种人表皮细胞能存活,但生长不太活跃.基底膜形成不明显.实验证明能在体外构建具有表皮与真皮复合皮肤,但这种复合皮能否作为一种临床有效皮肤还需进一步证实.