建立以HIF-1α为靶标的高通量筛选防治动脉粥样硬化先导化合物的细胞模型

摘要

目的建立一个高通量筛选防治动脉粥样硬化先导化合物的体外细胞模型。方法克隆HIF-1α低氧反应元件(hypoxia response element,HRE)至荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Enhancer,构建荧光素酶表达载体pGL3-HIF-1α-HRE,转染人单核细胞THP-1并筛选稳定表达细胞株THP-1-HIF-1α-HRE。结果 Real Time-PCR检测表明低氧培养可以有效上调THP-1-HIF-1α-HRE细胞HIF-1α蛋白表达和荧光素酶活性,而洛伐他汀和姜黄素预处理可以有效抑制低氧引起的THP-1-HIF-1α-HRE细胞内HIF-1α蛋白表达及荧光素酶活性。结论成功建立了筛选抗动脉粥样硬化的先导化合物体外高通量细胞模型THP1-HIF-1α-HRE。