槲皮素拮抗大气细颗粒物PM_(2.5)对大鼠胚胎毒性的体外研究

摘要

目的:探讨槲皮素对大气细颗粒物(fine particulate matter,PM_(2.5))发育毒性的拮抗作用及可能机制。方法:于2015年12月至2016年3月以大气采样器将北京市某地区采暖期PM_(2.5)收集在石英滤膜上,超声震动后将洗脱液过滤,冷冻干燥后得到PM_(2.5)样品。采用体外全胚胎培养模型,将胎龄9.5 d的SD大鼠胚胎以50 mg/L PM_(2.5)染毒,然后用不同剂量(0.1、0.5、1.0、5.0μmol/L)的槲皮素干预,培养48 h后对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。染毒结束后,剥离卵黄囊,制备胚胎单细胞悬液,通过流式细胞仪检测细胞线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成情况。结果:PM_(2.5)染毒后,大鼠体外胚胎的卵黄囊直径、头长、颅臀长和体节数明显减少,各组织器官形态学评分明显降低,细胞线粒体内ROS水平显著升高。槲皮素干预后,对PM_(2.5)致胚胎生长发育阻滞有明显改善作用,可使胚胎卵黄囊直径、颅臀长、头长增大,体节数增多,卵黄囊血管分化情况得到改善,并对PM_(2.5)所致的尿囊、体屈、心脏、后脑、中脑、前脑、听觉、视觉、嗅觉、腮弓、上颌突、前肢芽及后肢芽分化抑制均有不同程度的改善,细胞内线粒体ROS含量也显著降低。1.0μmol/L槲皮素干预效果最佳,其他3个剂量组的槲皮素干预也有一定的保护作用,但效果均不及1.0μmol/L剂量组。结论:适量补充槲皮素对PM_(2.5)致胚胎发育毒性有拮抗作用,清除线粒体内ROS可能是其机制之一。