纳米银对皮肤细胞半通道活性的影响及其在细胞增殖抑制中的作用

摘要

目的:探讨纳米银(silver nanoparticles,AgNPs)对皮肤细胞半通道活性的影响,并进一步研究半通道活性的改变在AgNPs诱导的细胞增殖抑制中的作用。方法:不同浓度(0、0.1、0.2、1.0、5.0、10.0、15.0和20.0μg/cm^2)的AgNPs处理人永生化表皮细胞系(HaCaT)24 h,采用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染料排除法测定细胞活性,采用溴化乙锭(ethidium bromide,EB)摄取法测定细胞半通道活性。通过以常规密度(4×10~4个/cm^2)或低密度(1×10~4个/cm^2)接种细胞及采用半通道抑制剂甘珀酸(carbenoxolone,CBX)预处理的方法调节细胞半通道活性,采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测半通道活性受抑制、不同浓度AgNPs作用后的HaCaT细胞的增殖水平。结果:当AgNPs浓度低于10μg/cm^2时,HaCaT细胞的细胞活性未受明显影响。10μg/cm^2的AgNPs作用2、12和24 h可导致细胞半通道活性升高至对照组的116.67%、124.85%和139.53%,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.01),且25、50和100μmol/L CBX预处理可明显抑制10μg/cm^2AgNPs作用24 h后的细胞的半通道活性(P<0.01)。此外,100μmol/L CBX预处理可升高低密度和常规密度下10μg/cm^2AgNPs作用24 h后细胞的增殖水平,其中,低密度下,CBX预处理组与AgNPs单独处理组相比,细胞增殖水平显著升高(P<0.01)。结论:一定浓度的AgNPs可激活HaCaT细胞的半通道,半通道活性升高在AgNPs引发的细胞增殖抑制效应中具有重要作用。