煤炭标准物质GBW11104对人肺腺癌A549细胞的毒性作用

摘要

目的 以体外培养的人肺腺癌A549细胞为靶细胞,探讨煤炭标准物质GBW11104对氧化应激指标、炎性细胞因子及非神经元型胆碱能系统关键分子乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱受体的影响.方法 将A549细胞暴露于不同浓度的GBW11104,染毒时长为24 h,通过CCK-8实验测定细胞存活率.随后选择对细胞活力无影响的剂量进行暴露实验,暴露结束后(24 h)通过比色法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的表达水平,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)方法测定白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量,使用改良Ellman方法测定细胞中的AChE活性,通过Real-time PCR法测定乙酰胆碱受体CHRNA9 mRNA的表达水平.结果 50、100、200μg·mL-1 GBW11104刺激细胞24 h后,对细胞存活率无影响(P均>0.05).与对照组相比,100μg·mL-1暴露组SOD活性降低了15.4％(P0.05).与对照组相比,100、200μg·mL-1暴露剂量下IL-6水平分别升高了74.5％和77.9％(P均<0.05).与对照组相比,100μg·mL-1暴露组AChE活性降低了12.2％(P<0.05).50、100、200μg·mL-1暴露剂量下细胞内CHRNA9 mRNA表达水平分别相当于对照组的231％、167％和71％(P均<0.05).结论 煤炭标准物质GBW11104暴露对人肺腺癌A549细胞有一定的毒性作用,具体表现为导致氧化应激及炎性反应,同时影响非神经元型胆碱能系统关键分子AChE及乙酰胆碱受体的水平.