沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA对乙肝疫苗HBsAg'a'表位构象的作用研究

摘要

目的:研究沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA对乙肝疫苗HBsAg'a'表位构象的形成作用.方法:将沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA基因克隆于PET32b载体上,与乙肝疫苗HBsAg'a'表位载体共转BL21菌,运用流式细胞仪和荧光显微镜观察HBsAg'a'表位构象的形成.结果:在没有沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA的情况下,HBsAg'a'表位的正确表达率仅为29.73%,而在共转沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA的BL21菌中,HBsAg'a'表位的正确表达率上升至59.78%,较前提高了1倍.荧光显微镜观察发现加入β-二巯基乙醇破坏二硫键的形成后,DsbA辅助形成HBsAg'a'表位的绿色荧光也随之消失.结论:沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA能够有效促进原核细菌胞膜上HBsAg'a'表位构象的正确形成.