抑制内质网相关降解途径引起大鼠肝细胞内质网应激和自噬增强

摘要

目的:探讨内质网相关降解途径(endoplasmic reticulum-associated degradation,ERAD)抑制对静息大鼠肝细胞自噬变化和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的影响.方法:培养的大鼠肝细胞株BRL用ERAD抑制剂EeyarestatinⅠ(EerⅠ)或b-AP15处理细胞12 h,用等体积的溶剂PBS作对照.用蛋白印迹技术检测ERS及其下游信号系统非折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)、细胞凋亡及自噬相关蛋白的表达变化,用CCK-8方法检测细胞活力.结果:与对照组比较,EerⅠ或b-AP15能剂量依赖性引起大鼠肝细胞自噬标志性蛋白beclin1、LC3-Ⅱ表达显著上调和LC3-Ⅱ/Ⅰ明显增高,ERS标志性蛋白GRP78、caspase-12和CHOP表达明显上调以及UPR相关蛋白p-IRE1α 和XBP-1S表达上调,细胞凋亡激活型caspase-3及其底物PARP-1裂解片段89 ku表达明显增加及细胞活力明显降低.结论:抑制ERAD通路可引起静息的大鼠肝细胞ERS和自噬增强.