基于Wnt/β-catenin信号通路探讨黄芪多糖对脾虚湿困大鼠小肠黏膜损伤修复作用机制

摘要

目的探讨黄芪多糖通过Wnt/β-catenin信号通路修复脾虚湿困大鼠小肠黏膜损伤的机制。方法60只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、黄芪多糖高剂量组(900 mg·kg^(-1)·d^(-1))、黄芪多糖中剂量组(600 mg·kg^(-1)·d^(-1))、黄芪多糖低剂量组(300 mg·kg^(-1)·d^(-1))、参苓白术散组(2.5 g·kg^(-1)·d^(-1))。除对照组外,其余组给予高脂低蛋白饲料加力竭游泳,连续8周,建立脾虚湿困大鼠模型。造模成功后,黄芪多糖及参苓白术散灌胃给药,持续2周。每周称体质量;测量各组大鼠小肠推进率;ELISA法检测各组大鼠D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)水平;qPCR法检测小肠组织Wnt1、β-catenin、CyclinD1、C-MYC mRNA的表达,Western blot法检测小肠组织Wnt1、β-catenin、CyclinD1、C-MYC蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组体质量显著低于对照组(P<0.01),血清D-LA、DAO水平显著升高(P<0.01),小肠推进率显著降低(P<0.01),Wnt1、β-catenin、CyclinD1、C-MYC mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组相比较,黄芪多糖高、中剂量组体质量显著高于模型组(P<0.05)。黄芪多糖高、中、低剂量组D-LA、DAO显著低于模型组(P<0.05,P<0.01),黄芪多糖高、低剂量组小肠推进率显著升高(P<0.05,P<0.01),黄芪多糖高、中、低剂量组Wnt1、β-catenin、C-MYC蛋白水平显著降低(P<0.01),黄芪多糖高、中剂量组CyclinD1蛋白水平显著降低(P<0.05,P<0.01),黄芪多糖高、中、低剂量组Wnt1、β-catenin mRNA表达显著降低(P<0.01),黄芪多糖高、中剂量组CyclinD1、C-MYC mRNA水平显著降低(P<0.01)。结论黄芪多糖可能通过下调脾虚湿困模型大鼠小肠组织Wnt/β-catenin通路蛋白表达,修复肠道黏膜损伤,发挥益气健脾利湿功效的作用。