构建RNA干扰载体特异性抑制绿色荧光蛋白表达的研究

摘要

目的:利用PCR构建RNA干扰质粒载体的方法,促进RNA干扰技术的广泛开展。方法:PCR方法获得小鼠U6+27启动子序列,以及干扰绿色荧光蛋白(EGFP)表达的siRNA的相应DNA模板序列。将其序列克隆入pUC19,获得RNA干扰载体pU6-siEGFP。将pU6-siEGFP及pcDNA3.1/EGFP共转导COS-7细胞,观察EGFP表达情况。结果:所构建的pU6-siEGFP能够成功干扰COS-7细胞中EGFP的表达。结论:PCR方法成功构建了RNA干扰载体,为RNA干扰技术在更多实验室的广泛开展奠定基础。