副干酪乳酸杆菌通过诱导负调控因子抑制单核巨噬细胞对脂多糖刺激的炎性细胞因子应答

摘要

目的:探讨副干酪乳酸杆菌(Lactobacillus paracacei,L.para)预刺激抑制脂多糖(Lipopolysacchride,LPS)诱导的炎性细胞因子释放的调节机制。方法:用佛波酯诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞样细胞;以L.para预刺激为实验组,小剂量LPS(10ng/ml)预刺激和TLR2激动剂Pam3CSK4预刺激为对照组,预刺激24 h后,再用LPS大剂量(1μg/ml)刺激经分化的THP-1细胞;检测预刺激对TLR信号通路负调控因子A20、SOCS1、SOCS3、IRAK3的表达水平,对TLR4和CD14的膜表达水平和mRNA水平,以及对大剂量LPS诱导的炎性细胞因子IL-1β、TNF-α水平的影响。各目的蛋白mRNA水平检测采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法,TLR4和CD14的膜表达检测采用流式细胞术。结果:L.para等预刺激能够降低LPS诱导的IL-1β、TNF-α表达水平;并能够上调细胞TLR信号途径负调控因子A20、SOCS1、SOCS3、IRAK3的mRNA水平,但不影响细胞膜的TLR4和CD14阳性百分率;IRAK1/4抑制剂能够减弱预刺激诱导的负调控因子表达水平,并减弱预刺激对LPS诱导炎症因子释放的抑制作用。结论:副干酪乳酸杆菌预刺激能够通过上调TLR信号通路负调控因子A20、SOCS1、SOCS3、IRAK3等的表达抑制单核巨噬细胞对LPS刺激的炎性细胞因子的释放。