视网膜母细胞瘤组织中赖氨酸羟化酶2表达及其对瘤细胞迁移和侵袭的影响

摘要

目的探讨前胶原赖氨酸-2-酮戊二酸-5-双加氧酶2(procollagen-lysine 2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2,PLOD2)在视网膜母细胞瘤中的表达,以及下调该基因对细胞迁移和侵袭的影响。方法选取2011年3月~2019年3月在湖北省大冶爱尔眼科医院和中国人民解放军广州军区武汉总医院行眼球摘除手术治疗的视网膜母细胞瘤患儿73例,同期,留取正常视网膜组织32例作为对照组,免疫组织化学法检测视网膜母细胞瘤和对照组组织中PLOD2蛋白表达,培养Y79细胞并分为PLOD2干扰组(I组)、阴性对照组(NC组)和空白组(B组),分别转染PLOD2干扰序列、阴性对照序列及不作任何处理,RT-qPCR检测PLOD2 mRNA表达,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测PLOD2,E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)表达。结果与对照组相比,在视网膜母细胞瘤组织中PLOD2蛋白阳性表达率升高(75.34%vs 25.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=23.493,P<0.001);与国际眼内视网膜母细胞瘤分类(intraocular international retinoblastoma classife,IIRC)D期[18(60%)]、未发生脉络膜浸润[31(65.96%)]和未发生视神经浸润[22(62.86%)]比较,IIRC分期E期[37(86.05%)]、发生脉络膜浸润[24(92.31%)]和发生视神经浸润[33(86.84%)]的视网膜母细胞瘤患者组织中PLOD2蛋白阳性表达率明显升高,差异均有统计学意义(χ^(2)=6.453,6.256,5.642,均P<0.05);与NC组和B组比较,在I组细胞中PLOD2 mRNA相对表达量明显降低(0.27±0.09 vs 1.01±0.08,1.00±0.05),差异有统计学意义(F=183.919,P<0.001);与NC组和B组比较,下调PLOD2表达后细胞迁移能力和侵袭能力均显著降低(F=10.163,24.094,均P<0.05);与NC组和B组比较,下调PLOD2表达后N-cad蛋白相对表达量明显降低,而E-cad蛋白相对表达量明显升高,差异均有统计学意义(F=62.122,36.641,均P<0.001)。结论视网膜母细胞瘤组织PLOD2蛋白呈高表达,下调PLOD2可抑制EMT而降低Y79细胞的迁移和侵袭力。