氧化石墨烯量子点用于牙周膜干细胞活细胞荧光标记的研究

摘要

目的氧化石墨烯量子点(GOQDs)可用于靶向荧光标记,同时干细胞示踪是干细胞治疗体内外研究的重要手段之一。文中旨在探究GOQDs作为人牙周膜干细胞(PDLSCs)的活细胞荧光标记材料使用的可能性,评价GOQDs材料的生物安全性,活细胞荧光标记效应。方法采用透射电子显微镜、动态光衍射仪、紫外⁃可见分光光度计和荧光分光光度计进行GOQDs表征。通过组织块贴壁及克隆筛选的方式获取PDLSCs,并进行角蛋白、波形蛋白染色证明其间充质来源,通过多向诱导分化证明其干细胞属性。将GOQDs与干细胞进行培养,采用不同浓度的GOQDs孵育(0、10、25、50μg/mL),24 h、72 h收集细胞,通过CCK⁃8法检测细胞毒性及增殖效应,流式细胞术检测细胞周期,最后通过激光共聚焦显微镜检测进入细胞后的荧光标记效应。结果GOQDs表征结果显示,干燥后的GOQDs具有较好的分散性,在365 nm的光照下呈现蓝光,粒径大小为(6.36±1.41)nm。PDLSCs抗波形蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性。细胞毒性检测结果显示,0、5、10、25、50μg/mL GOQDs的细胞活性差异无统计学意义(P>0.05),且24 h细胞活性与72 h比较无明显下降(P>0.05)。0μg/mL、50μg/mL GOQDs的S期、G期、G2期细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)。激光共聚焦结果显示,GOQDs能较好进入细胞,显示荧光,并随着处理时间的延长荧光强度上升。结论GOQDs具有良好的生物相容性,可用于PDLSCs的活细胞标记。