DNA免疫制备肝特异新基因FF456抗体及其应用

摘要

目的 :制备FF4 5 6抗体 ,并研究FF4 5 6在正常肝组织和肝癌组织中的表达情况和分布。　方法 :将FF4 5 6全长基因克隆于pCDNA3.1(- )真核表达质粒 ,直接免疫 6～ 8周龄雌性BALB/c小鼠 ,并对DNA的免疫条件进行优化。同时通过原核表达体系表达一段含FF4 5 6特异序列的肽段。利用该肽段作为抗原 ,检测DNA免疫得到的FF4 5 6抗血清的滴度及特异性 ,最后利用FF4 5 6抗血清对正常肝组织和肝癌组织进行免疫荧光染色。　结果 :west ernblotting及ELISA结果表明 ,DNA免疫得到的FF4 5 6抗血清特异性良好 ,最大抗血清滴度为 5 0 0 0 0左右。　结论 :FF4 5 6在正常肝组织中广泛表达 ,在肝癌组织中的表达量明显下调。