人三突变型低氧诱导因子1α真核表达载体的构建及鉴定

摘要

目的:为了深入研究人低氧诱导因子1α(HIF-1α)基因对冠心病患者的血管新生作用,构建人三突变型HIF-1α真核表达载体(pShuttle2-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803)。方法:双酶切pShuttle2-HIF-1α-Ala402-Ala564、pShuttle2-HIF-1α-Ala564-Ala803,胶回收前者酶切片段中300 bp的小片段及后者6300 bp的大片段,并将两者连接,重组成三突变型穿梭质粒pShuttle2-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803,并进行酶切和PCR鉴定。结果:经酶切鉴定及基因测序证实,重组三突变型穿梭质粒构建成功。结论:成功构建重组人三突变型HIF-1α真核表达载体pShut-tle2-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803,为进一步促进基因治疗缺血性心脏病的研究奠定基础。