SP600125对蛛网膜下腔出血大鼠海马区神经细胞自噬及神经细胞丢失的影响

摘要

目的适度自噬有利于提高神经细胞的存活率;而自噬过度又会引起细胞的调亡。文中旨在探讨SP600125对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马区神经细胞自噬及神经细胞丢失的影响。方法将健康雄性清洁级SD大鼠40只按随机化数字表法分为假手术组、模型组、二甲基亚砜(DMSO组)、SP600125组,每组10只。模型组、DMSO组和SP600125组应用血管内穿刺法制成大鼠SAH模型。采用3-0缝合线引入到右颈外动脉,通过颈内动脉推进刺破大脑前动脉和大脑中动脉分叉处,建SAH模型。假手术组除不刺破血管,其余操作均与模型组一致。SP600125组于造模前30 min,利用脑立体定位仪行侧脑室注射3μg/μL SP600125溶液10μL。假手术组和模型组均注射等体积等渗盐水,DMSO组注射等量的DMSO。24 h处死,HE染色观察各组海马区神经元形态及数量;免疫组化染色及Western blot法对p-JNK蛋白以及自噬标志物Beclin-1和LC3-Ⅱ进行定性定量检测。结果 HE结果显示,与假手术组比较,模型组海马区神经元排列紊乱、细胞多呈多边形、数量明显减少;与模型组比较,SP600125组海马区神经元损伤程度有所减轻、细胞明显增多。与假手术组大鼠海马区Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-JNK蛋白平均光密度值(1.56±0.28、1.60±0.30、1.58±0.32)比较,模型组(14.66±4.40、12.62±3.46、12.82±3.68)、DMSO组(13.85±3.85、11.59±4.52、13.03±3.53)和SP600125组(9.86±3.14、6.78±2.56、5.60±2.42)明显升高(P<0.05);SP600125组较模型组明显降低(P<0.05)。与假手术组大鼠海马区Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-JNK蛋白表达(0.136±0.014、0.126±0.012、0.102±0.009)比较,模型组(0.474±0.122、0.668±0.130、0.496±0.124)、DMSO组(0.432±0.102、0.628±0.113、0.416±0.094)和SP600125组(0.264±0.106、0.332±0.113、0.219±0.104)明显升高(P<0.05);而SP600125组较模型组明显降低(P<0.05)。结论SP600125对SAH后神经元细胞具有保护作用,其机制可能与SP600125通过抑制JNK信号通路的活性使自噬适度激活有关。