镍螯合脂质体修饰对TRAIL稳定性及半衰期的影响

摘要

目的:将TRAIL用镍螯合脂质体进行修饰,研究其对TRAIL稳定性及半衰期的影响.方法:制备镍螯合脂质体(LS-Ni),将其与含6 His标签的TRAIL孵育,得到TRAIL脂质体(LS-Ni-T);采用离心法与SDS-PAGE研究TRAIL与LS-Ni的亲和吸附效果;在正常及肿瘤细胞中检测LS-Ni-T的细胞毒性;评估LS-Ni-T在储存条件(4°C)和生理条件(37°C)下的稳定性;将LS-Ni-T经尾静脉注射小鼠体内,一定时间后分离血浆,测试其对Colo205细胞的细胞毒性以反映LS-Ni-T体内半衰期.结果:LS-Ni-T平均粒径为127.33±0.87 nm,电泳显示TRAIL可高效与LS-Ni结合,LS-Ni-T与TRAIL对正常及肿瘤细胞的毒性无显著性差异,LS-Ni-T在4°C和37°C下的稳定性显著优于TRAIL,药代动力学实验表明LS-Ni-T血浆代谢显著慢于TRAIL.结论:镍螯合脂质体修饰可增强TRAIL蛋白的体外稳定性并延长体内血浆半衰期.