端粒酶反义寡核苷酸对膀胱癌治疗作用的体外实验

摘要

目的:探讨端粒酶反义核苷酸对膀胱癌的治疗作用.方法:用TRAP-银染方法检测25例膀胱癌组织和4例癌旁组织中端粒酶活性的表达.以端粒酶RNA模板区为靶点,不同剂量的序列为TAGGGTTAGACAA的硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸(PS-ASON)作为实验组(A、B、C),以硫代磷酸修饰13个核苷酸的随机引物作为对照组(D),仅加入培养液作为空白对照组(E),与人膀胱癌细胞株BIU87细胞共同孵育1～30 d,计细胞数,光镜及电镜观察,DNA凝胶电泳检测、流式细胞仪测定和分析细胞的凋亡和坏死.结果:25例膀胱癌组织中,24例(96%)表达端粒酶活性,4例癌旁组织无端粒酶活性表达.与随机引物及空白对照组比较,实验组的ASON能明显减少细胞增殖数目,实验组细胞在第2、8天及8天后出现较明显的凋亡峰和DNA梯状电泳带,并出现退化、老化、凋亡和坏死的形态学变化,凋亡率明显增高(P＜0.001),并显示剂量的依赖性(P＜0.01).结论:以端粒酶RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸引起膀胱癌BIU87细胞增殖抑制,退化、老化、凋亡和坏死,对膀胱癌的治疗有潜在的意义.