一种基于胰蛋白酶酶解BSA获得小多肽库的新型手性固定相制备(英文)

摘要

介绍了一种基于小多肽库的高效液相色谱手性固定相(CSP)的制备.胰蛋白酶酶解牛血清白蛋白(BSA)的优化条件为:在pH8.2,37℃下,酶解6 h,所得到的小多肽库以最大截留分子量(MWCO)为6 000的超滤膜过滤,滤液为含分子量小于6000的多肽分子库,以羰基咪唑法将该小多肽库键合至氨基化硅胶上。与完整蛋白-CSP相比,该多肽-CSP拥有更高的多肽键合密度以及更好的稳定性。对流动相组成以及pH对保留和立体选择性的影响也进行了考察,在优化的条件下,D,L-色氨酸、D,L-酪氨酸以及手性药物R,S-盐酸苯海索在该新型多肽-CSP上均得到了很好的分离。