一种油菜及其近缘植物干种子基因组DNA提取方法

摘要

种子DNA提取是种子分子生物学研究最基础和最关键的步骤之一.为了建立一种能够从油菜及其近缘植物干种子中制备高丰度、高纯度DNA的方法,本试验分别以三大类型油菜(Brassica rape)、芸芥(Eruca sativa M.)和白芥(Sinapis alba L.)的干种子为材料,用一定量的抽提液来研磨种子,提取基因组DNA,并通过测定不同OD值和琼脂糖凝胶电泳分别检测DNA样品液的纯度、浓度和完整性.结果表明,DNA带型清晰,未发生降解;DNA样品OD260/OD280的值在1.792～1.905之间,均值为1.861,即纯度较高;OD320的值介于0.000～0.002之间,均值为0.0008,即DNA样品中悬浮物的量较少;所有DNA样品液的OD260/OD230的值均大于2.0,即DNA样品没有被碳水化合物、盐类所污染.PCR扩增产物的条带清晰可辨,能够实现多态性片段的分离.总之,本试验的材料易得,操作简便、实用,易于实施,在油菜种质资源分析、种子纯度鉴定乃至种子分子机理探索等方面具有重要意义.