亲和素磁珠分离毛竹SSR标记方法的优化

摘要

在参考其它文献报道的基础上,构建毛竹SSR位点富集文库.用EcoR I分别和Dra I、EcoR V、Sma I、Pvu Ⅱ四种平端限制性内切酶对毛竹基因组DNA进行双酶切,酶切片段回收后与根据抑制性PCR原理设计的接头连接.在利用亲和素磁珠富集含有SSR序列的DNA片段过程中,对杂交、漂洗及洗脱步骤进行优化.通过三引物特异PCR筛选含有SSR序列的阳性克隆并结合测序结果对富集SSR文库进行评价,确定了一条简单、经济、高效分离竹类植物SSR标记的方法.