抗除草剂转基因小麦生态安全性评估(三)--抗除草剂黑麦草自然突变体的离体筛选

摘要

多年生黑麦草为禾本科牧草,是转基因小麦基因漂流的主要对象之一.本研究在细胞培养条件下,采用在培养基中添加除草剂作为选择剂的方法,对多年生黑麦草的两个品种Tove和Napoleon进行离体筛选,并且在较高浓度的选择压力下,均获得了一定频率的抗Dalapon、草甘膦、精稳杀得和快锄四种除草剂的抗性愈伤组织.其中,Dalapon的浓度为2.88 mM时,Tove的抗性频率达0.56%,Napoleon的抗性频率为0.49%.而且,当Dalapon的浓度为4.32 mM时,Tove仍有0.5%以上的抗性愈伤组织产生.将Tove的抗性愈伤组织在MS0培养基上进行分化,并得到了200余棵完整植株.在细胞水平上和植株水平上进行鉴定,抗性愈伤组织的无性繁殖后代及其再生植株的抗除草剂特性均没有丧失.这表明,多年生黑麦草中确实存在一定频率的抗以上四种除草剂的自然变异体.