铁皮石斛多糖减轻高糖诱导的HK-2细胞损伤研究

摘要

目的:探讨铁皮石斛多糖是否通过调控微小RNA(miR)-363来影响高糖诱导的人肾小管上皮细胞HK-2损伤.方法:将HK-2细胞分为NG组(正常糖,5 mmol/L葡萄糖),HG组(高糖,30 mmol/L葡萄糖),HG+铁皮石斛多糖-L、M、H组(30 mmol/L葡萄糖+100 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL铁皮石斛多糖),HG+miR-NC (30 mmol/L葡萄糖+转染miR-NC)、HG+miR-363组(30 mmol/L葡萄糖+转染miR-363模拟物)、HG+铁皮石斛多糖+anti-miR-363组(30 mmol/L葡萄糖+转染anti-miR-363+400 μg/mL铁皮石斛多糖).采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;western blotting检测Bax、Bcl-2表达;试剂盒检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;定量Real-time PCR检测miR-363的表达.结果:铁皮石斛多糖提高高糖诱导的HK-2细胞的存活率、Bcl-2蛋白水平、SOD活性、miR-363表达水平,降低凋亡率、Bax蛋白水平、MDA含量,且均呈浓度依赖性(P＜0.05).过表达miR-363使高糖诱导的HK-2细胞的活性、Bcl-2蛋白水平、SOD活性、miR-363表达水平提高,凋亡率、Bax蛋白水平、MDA含量减少(P＜0.05).铁皮石斛多糖对高糖诱导的HK-2细胞存活率、凋亡及氧化应激的影响可被抑制miR-363逆转.结论:铁皮石斛多糖通过促进miR-363表达,增强高糖诱导的HK-2细胞活性,减弱其凋亡和氧化应激.