基于网络药理学研究归芪补血口服液抗HIV-1作用及机制

摘要

目的:通过体外实验研究归芪补血口服液复方制剂的抗HIV-1活性,并基于网络药理学挖掘潜在的作用机制,为开展中药制剂的药理研究提供理论依据。方法:通过ATP法评估药物对TZM-bl细胞和MT-2细胞的毒性作用;利用TZM-bl-HIV-1IIIB、MT-2-HIV-1IIIB两种细胞感染模型,通过荧光素酶活性检测试剂检测病毒活性从而评估药物抗HIV-1活性。基于网络药理学预测关键靶点和关键通路,利用分子对接模拟技术探索关键成分与关键靶点的相互作用,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测相关通路的关键靶点mRNA相对表达量。结果:归芪补血口服液对TZM-bl和MT-2两种细胞的50%细胞毒性浓度(CC50)分别是(13588±2633)μg/mL、(9846±2526)μg/mL;50%病毒抑制浓度(IC50)分别是(690.50±118.00)μg/mL、(585.80±176.00)μg/mL;SI(CC50/IC50)分别为19.60±1.70、17.03±0.86。网络药理学筛选出归芪补血口服液主要活性成分有槲皮素、山奈酚、木犀草素、豆甾醇、beta-谷甾醇等,关键靶点包括IL-6、IL1B、AKT1、JUN、HSP90AA1等,靶点富集的通路包括NF-κB信号通路、Toll-like受体信号通路和NOD-like受体信号通路等免疫及炎症相关的通路。分子对接结果显示,归芪补血口服液主要有效成分和靶点具有较稳定的结合活性;RT-qPCR实验结果显示,归芪补血口服液可下调IKBKB、FOS、TLR3、TLR8的mRNA表达,上调NFKBIA的mRNA表达。结论:归芪补血口服液复方制剂具有一定的抗HIV-1活性,可能通过调控IKBKB、NFKBIA、TLR3、TLR8和FOS等潜在靶点的mRNA表达水平来发挥抗HIV-1作用,其作用机制可能与NF-κB等信号通路相关。