藤茶提取物及活性成分对创伤弧菌的体外抑菌活性及作用机制

摘要

目的 研究藤茶提取物及活性成分对创伤弧菌的体外抑菌活性和作用机制,为其开发应用提供实验依据。方法 通过加热回流提取法制备藤茶水提取物、70%乙醇提取物,采用K-B纸片法、微量稀释法测定不同藤茶提取物及其活性成分对创伤弧菌的抑菌环直径、最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)。利用酶标仪测定培养液在不同作用时间下的吸光度(A_(600))值,分析不同浓度藤茶醇提物对创伤弧菌生长特性的影响;利用酶标仪结合试剂盒法测定不同浓度藤茶醇提物作用创伤弧菌6 h后的细胞外碱性磷酸酶(AKP)、核酸及可溶性蛋白质的含量,分析其对菌体细胞壁及细胞膜的影响。结果 (1)藤茶水提物、藤茶70%醇提物、二氢杨梅素、没食子酸对创伤弧菌的抑菌环直径(mm)为18.68±0.71、21.45±0.63、20.16±0.49、19.59±0.67,MIC分别为5.00、0.63、1.25、2.50 mg/mL,MBC分别为5.00、0.63、2.50、5.00 mg/mL。(2)与空白组相比,藤茶70%醇提物MIC、2 MIC浓度组均能够显著抑制菌体生长和引起胞外AKP、核酸、蛋白质含量的显著提高(P<0.01)。结论 藤茶提取物均具有良好的抑杀创伤弧菌作用,以70%醇提物作用更强;其抗菌作用机制与破坏菌体细胞壁和细胞膜的完整性有关,可作为新型植物源抑菌剂进一步开发。