桉树枯萎病菌Fusarium solani分子检测技术研究

摘要

桉树枯萎病是桉树人工林中的重要枝干病害,一旦发生则对桉树人工林造成严重危害,Fusarium solani是其主要病原之一。本试验通过RAPD标记技术,找到一条致病菌特异片段,对该片段进行克隆、测序,根据测序结果设计出特异性引物F9/R9,进一步优化扩增条件,并检测其灵敏度。结果表明,特异性引物F9/R9能从桉树枯萎病菌F.solani扩增出一条大小为200 bp左右的特异条带,而其它8种参试菌株和对照均无条带产生。该引物最低可以检测到4×10-7 ng·μL^-1的病原菌基因组DNA,也能检测到单个孢子的存在。同时可从发病桉树枝干和带菌土壤中特异性检测到枯萎病菌F.solani。因此,利用特异性引物F9/R9对桉树枯萎病菌F.solani快速检测技术操作简单,特异性强,可用于该病害早期诊断及检疫,对指导林农及时进行药剂防治,进而限制病害扩展具有重要意义。