人工设计二硫键增强谷氨酰胺转胺酶热稳定性

摘要

对S.hygroscopicus来源的谷氨酰胺转胺酶(microbial transglutaminase,MTG)进行分子改造,在MTG的N端区域引入二硫键,增强其热稳定性.通过序列比对与结构分析、运用Disulfide by Design软件,构建含有二硫键的突变体MTG (4-284).在55℃下处理10 min,MTG (4-284)可以保持95％的酶活,而原始酶MTG仅剩15％的酶活.圆二色谱检测结果显示MTG和MTG(4-284)的T50分别为58和65℃.以上结果对MTG的分子水平的深入研究提供了基础,同时进一步满足其工业化应用的需求.