Kex2p在甲醇酵母中的分泌表达

摘要

通过 PCR方法得到去除 C端 2 0 1个氨基酸残基 (胞浆区 ,跨膜区和 Ser/Thr丰富区 )的Kex2 p的 DNA片段 ,并将该片段装载到质粒 p PICZ- C中构建成表达质粒 p PICZ- C- KEX2 ΔCP。经过大肠杆菌 ( DH5 α)的扩增 ,表达质粒被转入甲醇酵母 ( GS1 1 5 )中 ,并得以分泌表达。发酵上清液中存在切割肽链中双碱性氨基酸 C端的酶活力。SDS- PAGE电泳的结果证实了 Kex2 p的分泌表达 ,以及 Kex2