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沉默circSATB2对结直肠癌细胞Caco2迁移、侵袭和凋亡影响的机制研究

         

摘要

目的 研究沉默circSATB2对结直肠癌细胞Caco2迁移、侵袭和凋亡的影响及其可能的机制.方法 qRT-PCR方法测定circSATB2在结直肠癌细胞SW480、HR-8348、Caco2和正常肠黏膜上皮细胞中的表达差异.结直肠癌细胞Caco2分成对照组、sh-NC(shRNA对照)组、sh-circSATB2(circSATB2 shRNA)组、sh-circSATB2+anti-miR-NC(circSATB2 shRNA、抑制剂对照)组、sh-circSATB2+anti-miR-150-5p(circSATB2 shRNA、miR-150-5p抑制剂)组,CCK-8实验检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法检测C-胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)、C-caspase-9、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9表达.荧光素酶报告系统鉴定circSATB2和miR-150-5p的靶向关系.结果 结直肠癌细胞SW480、HR-8348、Caco2中circSATB2水平高于正常肠黏膜上皮细胞(P<0.05).结直肠癌细胞Caco2中circSATB2水平高于结直肠癌细胞SW480、HR-8348(P<0.05).与对照组、sh-NC组比较,sh-circSATB2组结直肠癌细胞存活率降低,细胞迁移数目减少,细胞侵袭数目也减少,细胞凋亡率升高,细胞中C-caspase-3、C-caspase-9表达增多,MMP-2、MMP-9表达减少(P<0.05).与sh-circSATB2+anti-miR-NC组比较,sh-circSATB2+anti-miR-150-5p组结直肠癌细胞中miR-150-5p水平降低,细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,细胞迁移和侵袭数目增加,细胞中C-caspase-3、C-caspase-9表达减少,MMP-2、MMP-9表达增多.沉默circSATB2靶向促进结直肠癌细胞Caco2中miR-150-5p表达.结论 沉默circSATB2可能通过靶向促进miR-150-5p表达来发挥其抑制结直肠癌细胞Caco2迁移、侵袭,诱导细胞凋亡的作用.

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