脂多糖诱导高迁移率族蛋白B1在人牙髓细胞中转位的研究

摘要

目的:观察低浓度脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导人牙髓细胞（human dental pulp cells, hDPCs）中高迁移率族蛋白B1（high-mobility group box 1,HMGB1）在细胞中的转位及其hDPCs细胞活性的影响。方法:采用原代组织块培养法,培养人牙髓细胞,取第3～6代细胞用于实验。分别用含不同质量浓度（0、10、50、100、500、1 000 ng/mL）LPS的培养液培养hDPCs 3 d,采用CCK-8法检测细胞活性;100 ng/mL LPS刺激hDPCs后,免疫荧光检测0 h、6 h、12 h及24 h HMGB1在hDPCs中的表达定位,RT-PCR检测各时间点hDPCs细胞TNF-α,IL-1及HMGB1的mRNA表达,ELISA试剂盒分析细胞上清中HMGB1的含量。结果:低浓度LPS刺激hDPCs后,细胞活性并无明显改变,提示hDPCs具有抵抗低浓度LPS的能力。RT-PCR结果示LPS浓度在10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL时,IL-1和HMGB1的mRNA水平无显著变化;500 ng/mL和1 000 ng/mL时,TNF-α、IL-1和HMGB1的mRNA水平显著上调。免疫荧光示LPS诱导后,在6 h、12 h及24 h均可见hDPCs细胞浆中HMGB1的表达,ELISA结果示HMGB1能分泌到细胞上清中。结论:低浓度LPS可对hDPCs活性基本无影响,且可诱导HMGB1在hDPCs中从细胞核转位到细胞浆,并释放到细胞外。