安罗替尼对人肝癌细胞裸鼠移植肿瘤生长及生物钟基因表达的影响

摘要

[目的]探讨安罗替尼对人肝癌细胞裸鼠移植后肿瘤生长情况及相应生物钟基因表达的影响.[方法]选取实验无胸腺裸鼠共36只,取人肝癌HepG2细胞,移植于小鼠左侧腋皮下,建立裸鼠皮下肝癌移植瘤模型.接种完成1周后,随机分为安罗替尼处理组和对照组,每组18只.安罗替尼组给予安罗替尼50 mg/(kg·d)灌胃,空白对照组给予二甲基亚砜(DMSO)100pL/20(g·d)灌胃,每日1次,连续2周.在灌胃开始前和灌胃结束后24 h测量肿瘤体积情况.待2周后处死小鼠并剥离肿瘤,采用实时PCR(Real-Time PCR)法检测生物钟基因Per(Per1、Per2、Per3)、CLOCK、Cry(Cry1、Cry2)、Bmal1、Dec2和Timeless mRNA表达水平,同时运用western blot评估上述基因及蛋白质表达情况.[结果]与对照组相比,安罗替尼组裸鼠移植瘤较对照组生长缓慢,体积趋向于缩小.RT-PCR提示肝癌细胞中生物钟基因在安罗替尼作用下,Per1、Per2的mRNA表达量明显增加(P＜0.05),同时下游蛋白质表达量增加,而Dec2的mRNA表达量及下游蛋白质表达则明显受抑制(P＜0.05);Cry1的mRNA表达量不变,但相应的下游蛋白质表达受抑制.[结论]安罗替尼能显著调节肝癌细胞中多种生物钟基因表达,调控其相应表达产物生成,可抑制肝癌移植瘤的生长,其作用机制之一可能与调控生物钟基因表达密切相关.