神经生长因子联合盐酸氟桂利嗪对突发性耳聋小鼠的治疗效果及作用机制研究

摘要

目的 探讨神经生长因子(NGF)联合盐酸氟桂利嗪对突发性耳聋(SSNHL)模型的治疗效果及作用机制.方法 选用24只C57BL/6J小鼠建立SSNHL模型,根据随机数字表法分为3组:对照组(n=8)、模型组(n=8)和联合治疗组(n=8).对照组:正常小鼠+等量0.9％氯化钠溶液干预;模型组:SSNHL模型小鼠+等量0.9％氯化钠溶液干预;联合治疗组:SSNHL模型小鼠+皮下注射0.8μg NGF联合10 mg/kg盐酸氟桂利嗪胶囊治疗.通过组织学检测小鼠外毛细胞的凋亡和活力.通过荧光强度分析小鼠外毛细胞胞间通讯的完整度.通过HE染色评估各组螺旋神经节神经元.通过听性脑干反应(ABR)检测实验小鼠的听力损失.通过逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实时分析小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达.通过蛋白质印迹分析各组小鼠中凋亡相关蛋白细胞色素c(Cyt-c)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达.结果 与对照组相比,模型组外毛细胞活力、荧光强度、神经元数量、Bcl-2蛋白表达均降低,外毛细胞凋亡、TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA表达、Cyt-c、Caspase-3蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,联合治疗组外毛细胞活力、荧光强度、神经元数量、Bcl-2蛋白表达均升高,外毛细胞凋亡、TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA表达、Cyt-c、Caspase-3蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05).在8、16、32和48 kHz音调爆发时模型组较对照组的ABR阈值升高,联合治疗组较模型组的的ABR阈值降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 NGF注射联合盐酸氟桂利嗪灌胃可抑制SSNHL模型小鼠外毛细胞的凋亡、保护外毛细胞胞间通讯完整性并维持神经元数量,从而改善小鼠听力损失,其作用机制可能与抑制耳蜗组织炎症水平和细胞凋亡有关.