微量热泳动技术在生物分子相互作用研究中的应用

摘要

生物分子间相互作用的准确表征不仅能够为了解细胞中的生命过程提供必要的知识,而且还能够为药物的发现和发展铺平道路.生物物理技术由于其在通量和灵敏度上的优势,己成为研究生物分子相互作用的必不可少的技术之一.而具备低成本、检测速度快、操作体系简单并同时能提供丰富实验数据信息等优势的生物物理技术更是己成为检测生物分子间相互作用的首选技术.在本论文中,我们总结了使用微量热泳动仪(MicroScale Thermophoresis,MST)进行生物分子间相互作用研究的定性和定量分析成果,并展示了如何使用MST的拓展功能获得酶动力学参数和蛋白质稳定性参数.作为一种操作简单、结果准确的生物物理技术,MST依据微观温度梯度中分子的热泳移动变化来定量检测亲和力.与其它生物物理技术相比,MST的优势为无需固定、分析时间短、样品消耗少且能够在细胞裂解液等复杂溶液体系中进行亲和力分析等.在本论文中,我们将依次讨论MST的检测原理、实验操作流程和应用示例.