巨细胞病毒在体外培养血管内皮细胞中的增殖及对细胞形态和ATP酶活性的影响

摘要

目的 探讨巨细胞病毒(HCMV)在体外培养血管内皮细胞中增殖及对细胞形态和ATP酶活性的影响.方法 应用HCMV-AD169株感染体外培养的脐静脉血管内皮细胞,应用TCID50方法 测定HCMV在ECs中的增殖变化,荧光定量PCR方法 测定培养液DNA量的变化,运用化学方法 测定感染总ATP酶活性的变化,电子显微镜观察感染细胞的形态改变.结果 HCMV感染后12h即可检测到病毒,以后病毒滴度逐渐上升,48 h病毒增殖达高峰,随后缓慢下降.培养液HCMV-DNA量也呈现相似的变化.感染后48 h后细胞胞浆可见微泡样结构.电镜结果 显示48 h后可见线粒体肿胀、内质网扩张、溶酶体和高尔基体增生,次级溶酶体增多,病毒样颗粒及细颗粒病毒样包涵体.感染后24 h细胞总ATP酶开始下降,48、72 h与对照组相比下降明显(P＜0.01).结论 HCMV在体外对ECs有一定程度的直接作用,这可能作为启动因素之一在HCMV致动脉粥样硬化的发病机制中发挥重要作用.