酰基辅酶A合成酶长链家族成员4介导的脂质过氧化导致乳腺癌细胞发生铁死亡

摘要

目的 探讨酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的敲除和过表达对乳腺癌细胞MBA-MD-231细胞发生铁死亡的影响.方法 用CRISPR-Cas9技术敲除ACSL4,PLVX-puro质粒过表达ACSL4;用M T T实验检测铁死亡诱导剂处理WT、ACSL4-KO和ACSL4-OE细胞后的生存率;用流式分析技术检测铁死亡诱导剂RSL3处理细胞后脂质过氧化物的变化;用脂质氧化试剂盒检测铁死亡诱导剂RSL3处理细胞后丙二醛(MDA)变化.结果 与WT细胞相比,ACSL4-KO细胞对铁死亡诱导剂的抗性增加,ACSL4-OE细胞对铁死亡诱导剂的敏感性增加;铁死亡诱导剂RSL3处理后,ACSL4-KO细胞脂质过氧化物含量低于ACSL4-OE细胞,ACSL4-KO细胞MDA含量低于WT细胞,ACSL4-OE细胞MDA含量高于WT细胞.结论 ACSL4的敲除和过表达会改变MDA-MB-231细胞对铁死亡诱导剂的敏感性,ACSL4可能作为乳腺癌细胞铁死亡的关键因子.