柱前衍生RP-HPLC法测定林蛙皮胶原蛋白肽中18种氨基酸含量

摘要

采用柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,测定林蛙皮胶原蛋白肽(LWT)中18种氨基酸的含量。色谱柱为Ultimate○RAA氨基酸分析专用色谱柱(4.6×250mm,5μm);衍生试剂为异硫氰酸苯酯(PITC);流动相A:0.1moL/L醋酸钠溶液(pH6.5)和乙腈按93∶7的比例混合,流动相B:水-乙腈=20∶80,流速为1.0mL/min,进行梯度洗脱;检测波长为254nm。结果显示,18种氨基酸的分离效果良好,氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系;定量得到LWT中Glu,Gly,Lys,Leu等18种氨基酸的含量。