改良2-△△CT法分析RNASET2基因在卵巢癌卡铂耐药中的表达

摘要

目的:建立改良的相对定量2-△△CT法并应用其分析RNASET2基因在卵巢癌卡铂耐药细胞系中的差异表达.方法:分别提取卵巢癌卡铂耐药SKOV3细胞系与其亲本SKOV3 细胞系的总RNA,将等量的mRNA 逆转录为cDNA,应用实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR)技术检测核糖核酸酶T2(RNASET2)基因在卵巢癌卡铂耐药中的差异表达,参照2-△△CT公式的推导步骤,对其改良演化出一个新的公式即改良2-△△CT公式.以绝对定量法为对照,应用该公式分析real-time RT-PCR技术检测结果并比较两种方法的差异.结果:改良2-△△CT公式与绝对定量法分析实验结果差异无统计学意义(P＞0.05).卵巢癌卡铂耐药SKOV3细胞系RNASET2基因的表达相对于卵巢癌非耐药SKOV3细胞系的表达降低.结论:改良2-△△CT公式分析real-time RT-PCR反应数据是一种简便可行的相对定量方法,RNASET2表达下调与卵巢癌卡铂耐药相关.