RNAi抑制STAT3基因表达对人宫颈癌SiHa细胞化疗敏感性的影响

摘要

目的:探讨信号转导因子与转录激活因子3(STAT3)短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)真核表达载体对宫颈癌SiHa细胞化疗敏感性的作用.方法:构建STAT3基因shRNA真核表达质粒并转染宫颈癌SiHa细胞,RT-PCR及免疫蛋白印迹分别检测STAT3基因的mRNA及蛋白表达水平.细胞经不同浓度顺铂(DDP)作用后,流式细胞术(FCS)检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测细胞生长抑制率并计算DDP的50%抑制浓度(IC50).结果:与各对照组细胞相比,转染STAT3基因shRNA真核表达载体的SiHa细胞,STAT3基因在mRNA和蛋白水平表达均下降,凋亡率均明显增加,细胞对DDP的IC50值明显下降,差异均有统计学意义.结论:针对STAT3基因的shRNA真核表达载体有效地抑制宫颈癌SiHa细胞STAT3基因表达,增强其对化疗药物DDP的敏感性.