Cloning of human melanoma antigen MAGE-A9 and its expression in hepatocellular carcinomas

摘要

客观: 到快车，黑瘤联系了基因 MAGE-A9 recombinant 蛋白质，获得 anti-MAGE-A9 单音的同种细胞的抗体并且在 hapatocellular 癌标本检验 MAGE-A9 的表示。方法: MAGE-A9 cDNA 被使用克隆进原生质标志 pMD18-T 的 RT-PCR，然后潜水艇从人的 hepatocellular 癌组织克隆。在定序以后， MAGE-A9 被克隆进原核生物的表示向量 pBAD/g Ⅲ构造 recombinant 表示向量 pBAD/g Ⅲ -MAGE-A9, 并且被转变成 E。关口 i TOP10。recombinant MAGE-A9 蛋白质在 L-Arabinose 的正式就职下面被表示，并且通过 Hitrap 列被净化。anti-MAGE-A9 单音的同种细胞的抗体被产生。在 hepatocellular 癌标本的 MAGE-A9 的表示通过 ABC 试金被检验。结果：克隆的 MAGE-A9 基因的 cDNA 顺序与报导顺序一致。由亲密关系列和 SDS 页，净化的 MAGE-A9 熔化蛋白质显示了先生 35,000 的一个乐队，并且随后 anti-MAGE-A9 单音的同种细胞的抗体被获得。我们发现在积极房间和 MAGE-A9 抗原的胞质表示的 MAGE-A9 从 39 在 8 种情况中被检测(21%) hepatocellular 癌标本。结论: MAGE-A9 抗原在 hepatocellular 癌标本的一个公平比例被表示，这些病人可能是包含抗原的免疫者的合适的候选人，由 MAGE-A9 基因编码了。