结直肠癌细胞所致免疫抑制及免疫抑制分子分泌模式的研究

摘要

目的探讨结直肠癌细胞分泌的免疫抑制物质及抑制免疫功能的模式。方法制备结直肠癌Colon26细胞培养上清,采用MTT法检测其对T细胞转化和NK细胞的影响,直接免疫荧光FCM法检测对IL-2Rα、CD3ε+ζ+及CD3ε-ζ+表达的影响;定量ELISA法测定上清中TGF-β1、VEGF、IL-4、IL-6、IL-10和PGE2含量。结果 Colon26细胞可使5项免疫功能指标明显受抑制,抑制率分别为37.88%±7.38%、68.30%±10.44%、69.60%±5.15%、68.15%±2.17%、23.34%±2.86%。Colon26细胞可稳定分泌免疫抑制分子,以TGF-β1含量最高,为(1295.23±29.85)pg/ml;VEGF、IL-4、IL-6、IL-10、PGE2分泌量分别为(29.18±1.90)pg/ml、(27.70±0.70)pg/ml、(26.55±0.60)pg/ml、(29.52±2.50)pg/ml、(9.69±0.42)pg/ml。结论 Colon26细胞对T细胞增殖、活化及信号转导水平的抑制接近70%,对NK杀伤及ζ链介导的活化信号水平的抑制约30%。结直肠癌细胞可能通过分泌以TGF-β1为主的多种免疫抑制分子抑制NK细胞和T细胞免疫功能,介导肿瘤的免疫逃逸。