白坚木碱类二聚体在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

摘要

目的考察白坚木碱二聚体(10-dehydroxyl-12-demethoxy-conophylline,wtdr-11)在人类结肠癌细胞系Caco-2细胞模型中吸收和转运机制。方法建立Caco-2单层细胞完整模型,采用超高效液相色谱-荧光法(ultra-high performance liquid chromatography-fluorescence,UPLC-FLR)测定细胞模型中wtdr-11的浓度并计算表观渗透系数(apparent permeability coefficient,P_(app));分别考察不同浓度、时间、温度、pH值、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂(维拉帕米和环孢素A)对wtdr-11在Caco-2细胞内摄取的影响;考察时间变化对wtdr-11在Caco-2细胞中双向转运分别从细胞刷状缘侧(apical,AP)→细胞基底侧(basolateral,BL)和BL→AP方向的影响。结果wtdr-11的吸收随着时间和药物浓度的增加而增加,但温度、pH值和P-gp抑制剂等因素对Caco-2细胞吸收该药物的影响无统计学意义(P>0.05)。跨膜转运实验中,P_(app)>10^(-6) cm/s,外排率<1.5。结论wtdr-11的主要吸收机制可能是被动扩散,wtdr-11可能不是P-gp转运蛋白的底物。