PRRSV GP5与GP4蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究

摘要

[目的]实现PRRSV GP5与GP4蛋白在同一载体中表达各自编码的蛋白,发挥GP5蛋白在体液免疫中的优势和GP4蛋白在信号转导中的作用.[方法]利用RT-PCR扩增出GP5与GP4基因,克隆到pIRESneo载体的多克隆酶切位点及新霉素磷酸转移酶位点中,用Xho Ⅰ和Nru Ⅰ双酶切含GP5和GP4基因的表达盒,将此表达盒克隆到犬2型腺病毒E3区缺失性载体pPolyⅡ-CAV-2-△E3中,以AscⅠ和PmeⅠ双酶切进行鉴定.[结果]将构建好的重组腺病毒免疫小鼠,可以诱导产生较强的体液免疫应答(ELISA抗体和中和抗体).[结论]该重组腺病毒具有较好的免疫原性,可为研制有效的亚单位疫苗奠定基础.