山羊胎儿睾丸细胞体外分离培养及雄性生殖系干细胞的生长行为

摘要

采用4种不同的处理方法消化山羊胎儿睾丸组织,其中0.1%的胶原酶Ⅰ处理15 min后,用0.25%胰酶处理5 min,经3次洗涤,睾丸细胞分散较好.用不同的培养体系体外培养,结果显示:原代培养山羊胎儿睾丸细胞培养120h左右,获得桑椹状雄性生殖系干细胞(mGSCs)集落和单层支持细胞,mGSCs集落呈半悬浮式隆突生长,mGSCs集落和支持细胞分区明显;传代培养显示,在小鼠成纤维细胞饲养层上,mGSCs集落和mGSC单细胞被同质化程度较显著,而含有支持细胞的mGSC单细胞和mGSCs集落被同质化程度较弱;传代mGSCs集落和支持细胞共培养体系中,mGSCs集落正常生长,而且集落中细胞间隙紧密,mGSCs分化较慢.