CryIA(c)转基因结球甘蓝的抗虫性研究

摘要

以结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata)下胚轴为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciecin)介导法将苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫蛋白基因CryLA(c)导入结球甘蓝栽培品种中,共获得56株卡那霉素抗性植株.分别以CryLA(c)和NPTⅡ基因引物进行PCR扩增,结果43株均扩增出了预期的目的带.以CryLA(c)基因为探针,进行Southern blot分析,证明外源基因已经整合到甘蓝基因组中,且多数转基因植株只含有单拷贝的外源基因.离体叶片抗虫实验表明,转基因植株幼虫校正死亡率为40%,平均单虫重达到极显著水平,叶片损害程度差异明显,转基因植株抗性较对照显著提高.通过卡那霉素涂抹叶片和PCR扩增两种方法鉴定,表明外源基因在转基因甘蓝自交后代呈孟德尔单基因遗传.