普通质粒载体与Semliki森林病毒复制子载体表达GHRH的比较

摘要

新一代Semliki森林病毒RNA复制子源自甲病毒属(Alphavirus)Semliki森林病毒的基因组,它克服了一些现有的质粒载体表达效率低的缺点.研究首先对pIRES-neo表达载体用BamH I酶切和去磷酸化,连接LacZ基因,构建了普通真核表达载体pIRES-neo-LacZ;然后采用脂质体介导分别将含报道基因LacZ复制子载体pCMV-rep-LacZ以及两个普通表达载体pLNCX-LacZ和pIRES-neo-LacZ转染293细胞;将表达生长激素释放激素(GHRH)的复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体pIRES-GHRH和pCDNA3-GHRH转染293细胞.分别对不同载体转染细胞表达的a-半乳糖苷酶以及利用RIA和RT-PCR对表达的GHRH进行了定量分析,结果表明:复制子载体表达外源基因的效率比非复制子载体高2～3倍.