口蹄疫病毒3D蛋白在T4噬菌体衣壳表面的展示

摘要

通过PCR技术获得3D基因,使用拼接重叠延伸聚合酶链反应对3D基因内部的EcoR I位点进行定点突变,将突变后的3D基因克隆至原核表达质粒pSOC和T4噬菌体的穿梭质粒pR中,通过PCR及质粒酶切鉴定,分别获得阳性重组子pSOC-3D和pR-3D.将含有3D基因的重组质粒pSOC-3D转化大肠杆菌(Eschetichia coli)BL21进行表达,SDS-PAGE检测表达产物.将含有3D基因的重组质粒pR-3D转化T4噬菌体的宿主菌E2,通过同源重组获得重组噬菌体T4-3D,经SDS-PAGE及Western blot检测,证明展示在T4噬菌体表面的3D融合蛋白能与口蹄疫病毒(FMDBV)感染血清发生特异性反应.